http://hdl.handle.net/10946/3831 2020-11-18T22:36:22Z http://hdl.handle.net/10946/4792 Title: Subpoblaciones de Células B de pacientes con Lupus Eritematoso Sistémico y su relación con la actividad de la enfermedad y exposición ambiental Authors: Hurtado Montoya, Carolina; Vásquez Duque, Gloria María; Vásquez Trespalacios, Elsa María; Urrego Álvarez, Rodrigo Antonio; Agudelo Flórez, Piedad Matilde Abstract: Introducción: Ciertas subpoblaciones de linfocitos B se expanden en Lupus Eritematoso Sistémico (LES). La frecuencia de las células extrafoliculares active Naive (aNAV) y DN2 es mayor en pacientes con LES de ascendencia afroamericana y se asocia con actividad de la enfermedad y nefritis. La población de Colombia tiene una mezcla de ascendencia europea, indígena americana y africana. Se desconoce si los pacientes colombianos tienen las mismas distribuciones de células B descritas anteriormente y si están asociadas con la actividad de la enfermedad, manifestaciones clínicas y con exposiciones ambientales. Métodos: Se reclutaron 40 pacientes con LES que cumplieron con los criterios de ACR de 1982 y 17 controles sanos similares en edad y sexo. Las manifestaciones clínicas se registraron de las historias clínicas de los pacientes y la exposición ambiental se interrogó mediante una encuesta. Se analizaron linfocitos B periféricos criopreservados mediante citometría de flujo multiparamétrica. Las células se caracterizaron usando marcadores CD3, CD19, CD27, CD38, CD24, IgD, CD11c, CD21 y 9G4. Finalmente se evaluó el estado de metilación de DNA del gen IFI44L en la subpoblación de células B resting Naive. Resultados: Las células B extrafoliculares active Naive (aNAV) y DN2 se encontraban expandidas en pacientes activos, especialmente con actividad severa y se asociaron con la presencia de nefritis, anti-Sm positivo, anti RNP positivo y C3 bajo. Por otro lado, la disminución de las células de memoria que no han hecho el cambio de isotipo (USM) se asoció con el antecedente de trombosis. En cuanto la etnia, las frecuencias de las células aNAV y DN2 se comportaron de manera similar a lo descrito para los pacientes Afroamericanos con LES, a diferencia de lo descrito para los pacientes Caucásicos. En cuanto a la exposición ambiental, los pacientes expuestos ocupacionalmente a solventes orgánicos tenían frecuencias incrementadas de células CD27+ de memoria (SWM). Este cambio se asoció con solventes específicos como desengrasantes y acetonas. Además, un número limitado de sanos expuestos a solventes orgánicos mostraron una disminución en las células de memoria sin cambio de isotipo (USM), comparado con sanos no expuestos, con frecuencias similares a las observadas en pacientes con LES. Finalmente, a nivel epigenético se observó una hipometilación del promotor del gen IFI44L en la subpoblación de células B resting Naive (rNAV) en los pacientes en comparación con los sanos. Conclusión: Las células extrafoliculares aNAV y DN2 mostraron asociaciones clínicas importantes en los pacientes con LES, lo que sugiere un papel relevante en la fisiopatología de la enfermedad. Por otro lado, se observó por primera vez una alteración en las células de memoria SWM en los pacientes expuestos a solventes orgánicos, así como una alteración en las células USM en unos pocos sanos también expuestos, lo que abre diferentes posibilidades de investigación clínica y básica para corroborar estos hallazgos y profundizar en el conocimiento de la relación entre la exposición ambiental y LES. Finalmente, cambios en la metilación del gen IFI44L, que hace parte de la respuesta inducida por interferón, en una subpoblación precursora de células B sugiere que los cambios epigenéticos se establecen en etapas muy tempranas de la ontogenia de las células B. 2020-08-27T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10946/4777 Title: Relación de la vía de señalización Notch y los factores transcripcionales Krox-20, Oct-6 y Sox-10 con el daño neural inducido por Mycobacterium leprae en pacientes con enfermedad de Hansen Authors: Serrano-Coll, Héctor Alejandro; Salazar-Peláez, Lina María; Cardona-Castro, Nora María Abstract: Introducción: la lepra es una enfermedad infecciosa causada por Mycobacterium leprae, causando alteraciones tisulares en la piel y los nervios periféricos. Es factible que los cambios tisulares en lepra se relacionen con alteraciones en la actividad de la vía de señalización Notch y de ciertos factores transcripcionales del nervio (Krox-20, Oct-6, sox-10). Métodos: estudio observacional descriptivo. Se evaluaron 30 biopsias de piel de afectados con lepra y 15 de individuos sin lepra. En estas muestras, se evaluó la expresión génica de: Hes-1, Hey-1, Runx-1 Jagged-1, Notch-1, Numb, Krox-20, Oct-6 y Sox-10, usando q-PCR; además la expresión proteica con inmunohistoquímica de Runx-1 y Hes-1. Resultados: Se observaron cambios en la transcripción en la piel afectada con lepra en Hes-1 (subexpresado), Runx-1 (sobreexpresado), Oct-6 (subexpresado), Sox-10 (subexpresado). Los cambios de Oct-6 se relacionaban claramente con el deterioro nervioso (S-100). Por inmunohistoquímica se confirmaron estos cambios para Hes-1 y Runx-1, comprobándose que solo los cambios de Hes-1 estaban relacionados con alteraciones tisulares (epidermis, anexos cutáneos), al parecer estas alteraciones preceden al daño nervioso. Además, la subexpresión de Hes-1 y Oct-6, no se relacionan con los datos bacteriológicos y serológicos de los pacientes con lepra. Finalmente, se observó que Hes-1 y Oct-6 podrían tener utilidad semejante a la S-100, como biomarcadores en lepra. Conclusiones: los cambios tisulares observados en los pacientes con lepra podrían estar asociados a la reducción en la expresión de Hes-1 y Oct-6, además, estos dos marcadores tendrían utilidad en la detección temprana de la lepra. 2020-08-26T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10946/2135 Title: Expresión génica y caracterización de la vitronectina en epitelio bronquial humano ex vivo. Authors: Salazar Peláez, Lina María; Agudelo Florez, Piedad Matilde Abstract: La presente tesis se estructuró en nueve capítulos, incluyendo una sección final en donde se relacionan los productos de divulgación científica, realizados durante el desarrollo del trabajo doctoral. Sus 193 páginas, incluyen un artículo de revisión publicado en revista internacional, así como tres manuscritos originales, uno de ellos aceptado para publicación en revista internacional, otro sometido a evaluación por el comité editorial de una revista internacional y uno en preparación que se pretende sea publicado en una revista nacional. 2015-03-01T00:00:00Z