Amplificación del genoma de Mycobacterium avium sub especie paratuberculosis. Mediante qPCR a partir de macrófagos de tejido linfoide de bovinos con cuadros clínicos compatibles con enfermedad de johne.

Abstract

Usar macrófagos de bovinos, aislados a partir de tejido linfoide secundario como estrategia para el diagnóstico y aislamiento de cepas de MAP mediante pruebas de amplificación de ADN en bovinos con cuadros clínicos compatibles con la enfermedad de Johne. Métodos: 48 bovinos con signos de diarrea crónica y pérdida de peso fueron sacrificados, se obtuvieron entre 3 y 5 linfonodos mesentéricos (LNM) por individuo, los LNM se trasportaron en medio PBS estéril mas antibiótico y las muestras de tejido macerado fueron procesadas con un gradiente de densidad para separación de macrófagos, posteriormente fueron cultivados in vitro durante 24 horas a 37oC y 5% de CO2, a los macrófagos se le realizo la extracción de ADN para el diagnostico mediante el uso de qPCR.