Evaluación de daño en ADN en diferentes matrices biológicas por medio del ensayo cometa y la técnica halo como herramienta de biomonitoreo ambiental y ocupacional.

Abstract

La genotoxicidad es la capacidad de agentes físicos, químicos o biológicos de causar daño al material genético, el ensayo cometa y la técnica halo son dos metodologías que permiten medir este daño. El objetivo fue evaluar el daño en ADN en tres matrices biológicas por medio del ensayo cometa y la técnica halo, determinar su potencial uso como herramienta de biomonitoreo ambiental y ocupacional. Se obtuvieron linfocitos por venopunción y aislamiento por gradientes de densidad, las células lagrimales y nasales por toma directa de cada tejido; se expusieron a diferentes concentraciones de peróxido de hidrogeno (H2O2), se inmovilizaron sobre una matriz de agarosa, se realizó el ensayo cometa en condiciones alcalinas y la técnica halo en condiciones neutras. Se encontró que a medida que aumenta la concentración de H2O2 aumenta el daño de ADN en las diferentes matrices. Además, se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos (p<0,05). Los resultados demuestran que el ensayo cometa y la técnica halo son efectivas para evaluar daño en ADN, en linfocitos de sangre periférica, células epiteliales derivadas del conducto naso-lagrimal, y nasales. Los linfocitos de sangre periférica tienen menor daño en ADN basal, seguido por las células derivadas del conducto naso-lagrimal y finalmente las células nasales. Ambas técnicas son simples, rápidas y de bajo costo, no obstante, la técnica halo tiene mayor potencial de utilizarse como herramienta de biomonitoreo ya que puede ser aplicable a matrices biológicas que se obtienen de manera no invasiva y porque se requiere menos equipamiento de laboratorio.